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DNA CPG甲基化檢測的生物學作用
點擊次數:721 發布時間:2016-08-21
DNA CPG甲基化檢測特是一種靈敏度高且操作相對簡單的甲基化研究方法。重亞硫酸鹽處理DNA后,基因組DNA發生的由甲基化狀態決定的序列改變。隨后進行引物特異性的PCR。該方法引物設計是關鍵。MSP中設計兩對引物,即一對結合處理后的甲基化DNA鏈(引物對M),另一對結合處理后的非甲基化DNA鏈(引物對U)。檢測MSP擴增產物,如果用引物M能擴增出片段,則說明檢測位點存在甲基化;若用引物U擴增出片段,則說明被檢測的位點不存在甲基化。

DNA CPG甲基化檢測的生物學作用
1. DNA甲基化與遺傳印記、胚胎發育
DNA甲基化在維持正常細胞功能、遺傳印記、胚胎發育過程中起著極其重要的作用。研究表明胚胎的正常發育得益于基因組DNA適當的甲基化。
2.DNA甲基化與腫瘤
甲基化狀態的改變是引起腫瘤的一個重要因素,這種變化包括基因組整體甲基化水平降低和CpG島局部甲基化水平的異常升高,從而導致基因組的不穩定(如染色體的不穩定、可移動遺傳因子的激活、原癌基因的表達)和抑癌基因的不表達。DNA CPG甲基化檢測的研究,為腫瘤的早期預測、分類、分級及預后評估及治療新方法提供了新的依據
 
DNA CPG甲基化檢測的研究方法
1、基因組整體水平甲基化分析
液相色譜柱(HPLC)及相關方法、SssI 甲基轉移酶法 、免疫化學法 、氯乙醛法
2、特異性位點的DNA甲基化的檢測
甲基化敏感性限制性內切酶、直接測序法、甲基化敏感性單核苷酸引物延伸、結合重亞硫酸鹽的限制性內切酶法
甲基化敏感性單鏈構象分析、甲基化敏感性變性梯度凝膠電泳、甲基化敏感性解鏈曲線分析、熒光法
DNA微陣列法、甲基化敏感性斑點分析、甲基化特異性多連接依賴性探針、甲基化特異性的PCR
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